Leictreafóiréis Glóthach Polyacrylamide
Teicníc bhunúsach is ea leictreafóiréis glóthach i saotharlanna trasna na ndisciplíní bitheolaíocha, a cheadaíonn scaradh macramóilíní amhail DNA, RNA agus próitéiní. Ligeann meáin agus meicníochtaí deighilte éagsúla fo-thacair de na móilíní seo a dheighilt ar bhealach níos éifeachtaí trína dtréithe fisiceacha a shaothrú. Maidir le próitéiní go háirithe, is minic a roghnaíonn leictreafóiréis glóthach polyacrylamide (LEATHANACH).
Is teicníocht é LEATHANACH a scarann macramóilíní cosúil le próitéiní bunaithe ar a soghluaisteacht leictreafóiriteach, is é sin, cumas anailítí bogadh i dtreo leictreoid den lucht os coinne. I LEATHANACH, déantar é seo a chinneadh ag lucht, méid (meáchan móilíneach) agus cruth an mhóilín. Gluaiseann anailítí trí phiocháin a fhoirmítear i nglóthach polaiacrylamide. Murab ionann agus DNA agus RNA, athraíonn próitéiní i gceannas de réir na n-aimínaigéid ionchorpraithe, rud a d'fhéadfadh tionchar a imirt ar an gcaoi a ritheann siad. Féadfaidh teaghráin aimínaigéad struchtúir thánaisteacha a chruthú a théann i bhfeidhm ar a méid dealraitheach agus dá réir sin ar an gcaoi a bhfuil siad in ann gluaiseacht tríd na pores. Mar sin d’fhéadfadh sé a bheith inmhianaithe uaireanta próitéiní a dhínádúrú roimh an leictreafóiréis chun iad a líneáil má tá meastachán níos cruinne ar mhéid ag teastáil.
LEATHANACH SDS
Is teicníc é leictreafóiréis glóthach polyacrylamide sulfáit sóidiam-dodecyl a úsáidtear chun móilíní próitéine de mhais 5 go 250 kDa a scaradh. Déantar na próitéiní a dheighilt ar bhonn a meáchan móilíneach amháin. Cuirtear sulfáit dodecyl sóidiam, surfactant anionic, leis in ullmhú glóthacha a chumhdaíonn luchtanna intreacha na samplaí próitéine agus a thugann cóimheas muirir le mais cosúil leo. I bhfocail shimplí, dínádúraíonn sé na próitéiní agus cuireann sé lucht diúltach orthu.
LEATHANACH Dúchais
Teicníc is ea PAGE Dúchasach a úsáideann glóthacha neamhdhínádúraithe chun próitéiní a scaradh. Murab ionann agus SDS LEATHANACH, ní chuirtear aon oibreán dínádúraithe leis in ullmhú glóthacha. Mar thoradh air sin, tarlaíonn scaradh na próitéiní ar bhonn muirear agus méid na próitéiní. Sa teicníc seo, is iad slabhraí comhfhoirmithe, fillte agus aimínaigéad na próitéiní na fachtóirí a bhfuil an deighilt ag brath orthu. Ní dhéantar damáiste ar na próitéiní sa phróiseas seo, agus is féidir iad a aisghabháil tar éis scaradh a chríochnú.
Conas a oibríonn leictreafóiréis glóthach polyacrylamide (PAGE)?
Is é bunphrionsabal LEATHANACH anailísí a scaradh trína gcur trí phiocháin glóthach polyacrylamide ag baint úsáide as sruth leictreach. Chun é seo a bhaint amach, déantar meascán aicriolaimíde-dé-bhiscrilaimíde a pholaiméiriú (polaicrylamide) trí shársulfate amóiniam (APS) a chur leis. Cruthaíonn an t-imoibriú, a chatalaítear le tetramethylethylenediamine (TEMED), struchtúr cosúil le glan le pores trína bhféadfaidh anailítí bogadh (Fíor 2). Dá airde an céatadán den aicriolaimíd iomlán atá san áireamh sa fhoirmiú, is lú an méid pore, mar sin is lú na próitéiní a bheidh in ann dul tríd. Beidh tionchar freisin ag an gcóimheas idir aicriolaimíde agus déshicrilimíd ar mhéid an phiocháin ach is minic a choinnítear é seo tairiseach. Laghdaíonn méideanna pore níos lú freisin an luas ar a bhfuil próitéiní beaga in ann bogadh tríd an glóthach, ag feabhsú a n-réitigh agus a chosc ó rith amach go tapa sa mhaolán nuair a chuirtear sruth i bhfeidhm.
Trealamh le haghaidh Leictreafóiréis Glóthach Polyacrylamide
Cill Leictreafóiréis Glóthach (Umar/Seomra)
Tá an umar glóthach le haghaidh leictreafóiréis glóthach polyacrylamide (PAGE) difriúil ón umar glóthach agarose. Tá an umar glóthach agarose cothrománach, agus tá an umar PAGE ingearach. Trí chill leictreafóiréis ingearach (umar/seomra), déantar glóthach tanaí (1.0mm nó 1.5mm de ghnáth) a dhoirteadh idir dhá phláta gloine agus gléasta ionas go mbeidh bun an fhoirmiú báite i maolán i seomra amháin agus tá an barr báite i maolán. i seomra eile. Nuair a chuirtear sruth i bhfeidhm, aistríonn méid beag maoláin tríd an glóthach ón seomra uachtarach go dtí an seomra íochtair. Le teanntáin láidre chun a chinntiú go bhfanann an tionól ina seasamh, éascaíonn an trealamh ritheanna glóthacha tapa le fuarú fiú agus bannaí ar leith mar thoradh air.
Déanann Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biteicneolaíocht) raon méideanna de chealla leictreafóiréis glóthach polyacrylamide (umair / seomraí). Is cealla leictreafóiréis ingearacha (umair/seomraí) iad na samhlacha DYCZ-20C agus DYCZ-20G chun anailís a dhéanamh ar sheicheamhú DNA. Tá cuid de na cealla leictreafóiréis ingearach (umair / seomraí) comhoiriúnach leis an gcóras blotting, cosúil leis an tsamhail DYCZ-24DN, DYCZ-25D agus DYCZ-25E ag luí le múnla an chórais Western Blotting DYCZ-40D, DYCZ-40G agus DYCZ-40F, a úsáidtear chun an móilín próitéine a aistriú ón glóthach go membrane. Tar éis leictreafóiréis SDS-PAGE, is teicníc é Western Blotting chun próitéin shonrach a bhrath i meascán próitéin. Is féidir leat na córais blotting seo a roghnú de réir na gceanglas turgnamhacha.
Leictreafóiréis Soláthar Cumhachta
Chun an leictreachas a sholáthar chun an glóthach a rith, beidh gá agat le soláthar cumhachta leictreafóiréis. Ag Biteicneolaíocht Liuyi soláthraímid raon soláthairtí cumhachta leictreafóiréis do gach feidhmchlár. Is féidir leis an tsamhail DYY-12 agus DYY-12C le voltas ard cobhsaí agus reatha freastal ar leictreafóiréis riachtanas ardvoltais. Tá feidhm aige maidir le seasamh, uainiú, VH agus cur i bhfeidhm céim ar chéim. Tá siad iontach do chur i bhfeidhm leictreafóiréis seicheamhaithe IEF agus DNA. Le haghaidh próitéine ginearálta agus cur i bhfeidhm leictreafóiréis DNA, tá an tsamhail DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, agus mar sin de, atá freisin soláthairtí cumhachta díolacháin te le cealla leictreafóiréis (umair / seomraí). Is féidir iad seo a úsáid le haghaidh feidhmeanna leictreafóiréis lár agus ísealvoltais, mar shampla le haghaidh úsáid saotharlainne scoile, saotharlann ospidéil agus mar sin de. Níos mó samhlacha le haghaidh soláthairtí cumhachta, tabhair cuairt ar ár láithreán gréasáin.
Tá stair níos mó ná 50 bliain ag branda Liuyi sa tSín agus is féidir leis an gcuideachta táirgí cobhsaí agus ardchaighdeáin a sholáthar ar fud an domhain. Trí fhorbairt na mblianta, is fiú do rogha féin é!
Le haghaidh tuilleadh eolais maidir linn, déan teagmháil linn trí ríomhphost[ríomhphost cosanta] or [ríomhphost cosanta].
Tagairtí do Cad is leictreafóiréis glóthach polyacrylamide ann?
1. Karen Steward PhD Leictreafóiréis glóthach polyacrylamide, Conas a Oibríonn sé, Athróga Teicnící, agus A Feidhmchláir
Am postála: Bealtaine-23-2022